Гистологические и электронно-микроскопические особенности внеклеточного матрикса инвазивной протоковой карциномы молочной железы без особого типа. Отчет о 5 случаях и обзор литературы
Резюме Инвазивная протоковая карцинома, не имеющая особого типа, является наиболее распространенным типом рака молочной железы. В свете вышеизложенного многие авторы представили гистологические и электронно-микроскопические характеристики этих опухолей. С другой стороны, существует ограниченное число работ, авторы которых сосредоточились на изучении внеклеточного матрикса. В данной статье представлены данные, полученные в результате светового и электронно-микроскопического исследования внеклеточного матрикса, ангиогенеза и клеточного микроокружения инвазивной протоковой карциномы молочной железы без особого типа. Авторы показали, что процессы формирования стромы при IDC типа NOS связаны с присутствием фибробластов, макрофагов, дендритных клеток, лимфоцитов и других клеток. Также было показано детальное взаимодействие вышеперечисленных клеток друг с другом, а также с сосудами и фибриллярными белками, такими как коллаген и эластин. Микроциркуляторный компонент характеризуется гистофизиологической гетерогенностью, которая проявляется в активации ангиогенеза, относительной дифференцировке сосудов и регрессии отдельных компонентов микроциркуляции.
Вступление Несмотря на то, что диагностика и лечение новообразований молочной железы в настоящее время весьма успешны, вопросы дифференциальной диагностики, грамотного обследования и комбинированного лечения рака молочной железы по-прежнему имеют первостепенное значение. Доброкачественные изменения в молочных железах относятся к группе распространенных заболеваний у женщин разного возраста, при этом следует учитывать, что проблема дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных поражений молочной железы со временем не теряет своей актуальности. Чтобы понять патогенез рака молочной железы при доброкачественных заболеваниях молочной железы, необходимо проанализировать перестройку двух структурно и функционально взаимосвязанных тканевых компонентов, таких как паренхима и строма. Морфологических критериев, традиционно считающихся прогностическими, не всегда достаточно для описания биологического поведения и метастатического потенциала опухоли. В контексте профилактики рака многие исследователи ищут новые и более информативные параметры. В связи с этим особое внимание уделяется изучению стромы опухоли. Мы представляем комплексный морфологический анализ внеклеточного матрикса опухоли в пяти случаях инвазивной протоковой карциномы молочной железы неуказанного иным образом типа (IDC NOS type).
Материалы и методы Этические соображения Данное исследование соответствовало принципам Хельсинкской декларации. Участники предоставили письменное информированное согласие до их включения в исследование.
Хирургическая резекция и перекрестный опрос Объектами исследования были хирургические образцы пяти молочных желез, полученные путем секторальной резекции с лимфаденэктомией по типу IDC NOS. Размер резецируемого участка молочной железы варьировал в пределах от 1,5 до 6,5 см в диаметре. До резекции опухоли пациенты не получали какой-либо специфической лучевой терапии или химиотерапии. Макроскопическое исследование хирургических образцов проводилось в соответствии с протоколом общего обследования, разработанным Колледжем американских патологоанатомов (CAP).
Гистологическое исследование Образцы для световой микроскопии фиксировали в 10% растворе формалина с нейтральным буфером. Материал помещали в формалин таким образом, чтобы сохранить гистотопографию как опухоли, так и окружающих тканей. Затем образцы заливали в парафин. После предварительной депарафинизации парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином. В дополнение к окрашиванию H&E мы использовали метод Ван Гизона и окрашивание трихромом Массона-Голднера для оценки волокнистого состава стромы опухоли. Степень злокачественности опухолей оценивали с помощью Ноттингемской гистологической шкалы.
Исследование методом ПЭМ Для электронно-микроскопического исследования образцы фиксировали в 2,5% растворе глутарового альдегида (рН 7,3-7,4) в течение 4 часов. Постфиксацию проводили в 1%-ном растворе OsO₄ в 0,1 М фосфатном буфере (рН 7,4). Затем образцы обезвоживали в этаноле и ацетоне, а затем помещали в среду, состоящую из аралдита (отвердитель HY-964), аралдита М и смеси epon-812. Ультратонкие срезы контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца (по методу Рейнольдса) и изучали под просвечивающим электронным микроскопом.
Результаты Результаты нашего исследования показывают, что внеклеточный матрикс стромы типа IDC NOS содержит большое количество тонких и толстых коллагеновых фибрилл, сосредоточенных в периваскулярной ткани, а также в очагах десмопластической реакции (рис. 1). С помощью ПЭМ мы выявили тонкие микрофибриллы диаметром 30-50 нм и более толстые фибриллы диаметром до 100 нм с поперечной исчерченностью (реже без нее), локализованные вблизи фибробластов и миофибробластов. Довольно часто базальные мембраны прилегали к цитоплазме клеток карциномы (рис. 2). В некоторых очагах внеклеточного матрикса мы обнаружили поперечнополосатые коллагеновые волокна, а также микрофибриллы в форме электронно-плотных стержней (рис. 3).
Микроциркуляторное русло внеклеточного матрикса было представлено новообразованными сосудами, которые по своим структурным и функциональным характеристикам мы классифицируем как сосуды тококапиллярного типа, капиллярного типа, синусоидального типа и венулоподобные микрососуды. Особенно многочисленны микрососуды капиллярного типа. Примечательно, что мы часто не обнаруживали качественно сформированные перициты в исследованных опухолевых сосудах. Находясь вблизи эндотелия, окруженные электронноплотным материалом, опухолевые клетки контактировали с эндотелиальными клетками через отростки последних (рис. 4). Это явление можно рассматривать как проявление васкулогенной мимикрии опухоли.
Морфология перицитов в быстро пролиферирующих тканях, включая раковые, может быть очень разнообразной. В таких условиях трудно определить морфологические критерии, однозначно характеризующие перицитные клетки. В сосудах опухолевой ткани часто не обнаруживается хорошо сформированная базальная мембрана (рис. 5). Кроме того, в двух случаях была обнаружена инфильтрация тучных клеток вблизи сосудов (рис. 6). Интенсивность инфильтрации стромальных клеток во всех пяти опухолях была высокой, особенно на периферии опухолей. Среди стромальных клеток было выявлено наличие фибробластов, миофибробластов средней плотности, миоэпителиальных клеток, дендритных клеток, макрофагов, а также лимфоцитов, активно взаимодействующих с атипичными эпителиальными клетками (рис. 7-8).
Кроме того, мы выявили большое количество фиброцитов и фибробластоподобных коллагенообразующих клеток с крупными активными ядрами в сочетании с развитой гранулярной эндоплазматической сетью и небольшим количеством активных полисом, которые являются типичными признаками секреторных клеток. Эти клетки, вероятно, синтезируют компоненты внеклеточного матрикса. Основные клинические, гистологические и электронно-микроскопические характеристики всех исследованных опухолей приведены в таблицах 1-3.
Рисунок 1. А. Волокнистый компонент внеклеточного матрикса типа IDC NOS. Множество тонких и толстых коллагеновых волокон с рассеянными фибробластами и фибробластоподобными клетками. Б. Десмопластический компонент внеклеточного матрикса типа IDC NOS. Множество толстых коллагеновых волокон с редкими фибробластами и фибробластоподобными клетками. В десмопластической строме наблюдается образование опухолевых сосудов. C. Десмопластический компонент внеклеточного матрикса типа IDC NOS. Множество толстых коллагеновых волокон со скудными фибробластами и фибробластоподобными клетками. Вложенные в ткани десмопластической стромы, наблюдается разрастание опухолевых клеток. Окраска по Ван Гизону. D. Десмопластический компонент внеклеточного матрикса типа IDC NOS. Много толстых коллагеновых волокон с редкими фибробластами и фибробластоподобными клетками. В десмопластической строме наблюдается гнездовая пролиферация опухолевых клеток, а также образование опухолевых сосудов. Окраска трихромом по Массон-Гольднеру.
Рисунок 2. ПЭМ: Тонкие микрофибриллы в строме типа IDC NOS расположены близко к фибробластам и макрофагам.
Обсуждение Поскольку эпителиальные новообразования молочной железы последовательно проходят различные стадии канцерогенеза, их пролиферативная активность и скорость деления клеток увеличиваются. Таким образом, по сравнению с доброкачественными новообразованиями, при раке молочной железы (включая тип IDC NOS) наблюдается повышение пролиферативной активности, что, как показано, связано с более высокой активностью клеточного цикла в опухолевых клетках.
При гистологическом исследовании тип NOS при IDC очень неоднороден и характеризуется множеством различных форм опухолевого роста. Например, наиболее распространенными формами являются вложенные скопления, тяжи и пучки, трубчатые структуры и солидные разрастания, состоящие из атипичных клеток с неправильными ядерными и цитоплазматическими границами, повышенным ядерно-цитоплазматическим соотношением, а также различным количеством ядрышек. Однако DCIS и некротические участки распада опухоли также часто наблюдаются рядом с инвазивным компонентом карциномы.
Большинство авторов описывают массивный стромальный склероз с различными проявлениями десмоплазии и стромальной инвазии атипичных опухолевых клеток. Более того, следует учитывать, что вышеупомянутые структуры стромы также характерны для редких форм рака, таких как карцинома с остеокластоподобными клетками и карцинома с микрогландулярным аденозом.
Эти склеротические и десмопластические изменения не всегда очевидны, особенно при наличии повышенной клеточности опухоли, и простые гистохимические методы (включая методы Ван Гизона и трихромные красители, такие как Мэллори, Массон или трихром Гольднера) могут быть полезны при изучении внеклеточного матрикса. Например, Фу и др. использовали окрашивание по Массону для изучения фибробластов, ассоциированных с раком, при инвазивной протоковой карциноме молочной железы типа NOS.
Рисунок 3. А. ПЭМ: Синтетически активный ассоциированный с раком фибробласт коллагенового матрикса, расположенный вблизи протокапилляров. Б. ПЭМ: Коллаген в форме полоски и микрофибриллы во внеклеточном матриксе.
Рисунок 4 (слева). ПЭМ: Протокапилляр, содержащий эритроцит впросвете без перицитов. Фибробласт, ассоциированный с раком , слева от сосуда.
Рисунок 6 (справа). ПЭМ: Капилляр с лимфоцитом и эритроцитом впросвете. Тучная клетка прикрепляется к стенке капилляра.
Рисунок 7 (справа). ПЭМ: Фибробласты и макрофаги в строме опухоли
Рисунок 8. ПЭМ: лимфоэпителиальный симбиоз в строме опухоли.
Волокнистый состав опухоли Изменения в строме опухоли при прогрессировании инвазивной протоковой карциномы молочной железы включают уменьшение общего количества основного вещества и увеличение содержания фибриллярных белков, особенно коллагена и фибронектина. Таким образом, формируется склерозированная и десмопластическая строма опухоли, где коллагеновые фибриллы играют роль связующего элемента — "рельсов", которые увеличивают миграционный потенциал клеток карциномы и облегчают их инвазию в строму. Тонкие и толстые коллагеновые фибриллы можно визуализировать с помощью просвечивающей электронной микроскопии, а их взаимодействие с клетками может быть продемонстрировано как в общих чертах, так и в деталях.
Интересно, что коллаген IV типа, обычно являющийся неотъемлемым компонентом базальных мембран, не является фибриллярным белком и, в отличие от других типов коллагена, накапливается в опухоли в меньшей степени. Предполагается, что дефекты базальной мембраны опухоли, включая базальные мембраны сосудов, связаны с механизмом снижения накопления коллагена IV типа, что способствует лимфоваскулярной инвазии при карциноме молочной железы. В то же время в различных опухолях наблюдается увеличение циркулирующего коллагена IV типа, что может рассматриваться как потенциальный биомаркер роста метастазов, в том числе при карциноме молочной железы.
Сосуды Изменения в гистоархитектонике микрососудов и, следовательно, в микроциркуляции являются неотъемлемой частью прогрессирования рака молочной железы. Карциномы молочной железы характеризуются увеличением количества кровеносных сосудов, которые преимущественно локализуются в периферической зоне опухоли. Марина А. Сенчукова и др. в своем исследовании классифицировали опухолевые сосуды при IDC NOS, различая нормальные микрососуды (MV) перитуморальной и внутриопухолевой стромы, расширенные капилляры (DCs) перитуморальной стромы, атипичные расширенные капилляры (АЦК) и сосудоподобные структуры, называемые “полостными” структурами с эндотелиальной выстилкой (тип CS2) или без нее (тип CS1).
Как и в предыдущих исследованиях, проведенных нашими коллегами, мы не всегда наблюдали перициты в опухолевых капиллярах. Наличие перицитов во многих опухолях, включая IDC NOS, является весьма спорным вопросом в контексте прогноза опухоли. Например, высокая экспрессия в перицитах NG2, PDGFRβ и десмина связана с повышением иммунитета к опухоли, ингибированием метастазирования и улучшением перфузии.
Таблица 1. Клиническая картина опухолей.
Таблица 2. Гистологические характеристики образцов опухолей.
Таблица 3. Просвечивающие электронно-микроскопические характеристики внеклеточного матрикса опухоли.
В то время как высокая экспрессия CD248, Kfl4, Rgs5, GT198 и EPT в перицитах связана с более высоким потенциалом метастазирования опухоли и более выраженными гипоксическими изменениями.
Клетки Строма опухоли типа IDC NOS характеризуется разнообразным клеточным составом. Клетки стромы опухоли можно разделить на несколько групп, таких как миоэпителиальные клетки, ассоциированные с раком фибробласты и миофибробласты, дендритные клетки, макрофаги, внутриопухолевые и перитуморальные клетки, а также лейкоциты.
Миоэпителиальные клетки Миоэпителиальные клетки представляют собой вытянутые веретенообразные клетки с небольшим удлиненным или круглым ядром, содержащим мышечные микрофиламенты. Эти клетки, сокращаясь, ограничивают ацинусы молочной железы и способствуют секреции. Однако миоэпителиальные клетки также играют важную роль в подавлении онкологических заболеваний, поскольку они синтезируют компоненты базальной мембраны, тем самым отделяя эпителиальные клетки от сосудов. Кроме того, миоэпителиальные клетки могут ингибировать ангиогенез (включая опухолевый ангиогенез), выделяя антиангиогенные молекулы, такие как маспин, TIMP-1, тромбоспондин-1 и растворимые рецепторы bFGF.
Ассоциированные с раком фибробласты Ассоциированные с раком фибробласты (CAF) и миофибробласты представляют собой особый тип опухолевых стромальных клеток, которые могут изменяться в процессе онкогенеза. CAF имеют геном, отличный от нормальных фибробластов, и проявляют проонкогенные свойства, синтезируя опухолевый коллаген и фибронектин, а также непосредственно активируя опухолевый ангиогенез. Эти эффекты во многом связаны с повышенной секрецией SDF-1 как фактора пролиферации стромальных клеток, а также с молекулами сигнальных путей HIF1-альфа и NF-kB. Высокий уровень CAF часто напрямую связан с метастазированием в лимфатические узлы и отдаленными метастазами, включая головной мозг и легкие.
Дендритные клетки Дендритные клетки являются представителями клеток опухолевой стромы типа IDC NOS, обладающими как про-, так и противоонкогенными свойствами. Эти свойства напрямую связаны с представлением антигенов и созреванием дендритных клеток. Так, Fainaru и соавт. показали, что незрелые дендритные клетки могут активировать ангиогенез опухоли, увеличивая метастатический потенциал, тогда как зрелые дендритные клетки, как правило, проявляют антиангиогенные и другие противоонкогенные свойства. Интересно, что опухолевые клетки часто способны замедлять созревание дендритных клеток, синтезируя VEGF, хемокины CCL2, CXCL1, CXCL5 и другие факторы. Это увеличивает антиапоптотический и метастатический потенциал опухоли.
Макрофаги Макрофаги проявляют как про-, так и противоонкогенные свойства. Существуют две основные группы макрофагов, ассоциированных с опухолью: классически активированные (также известные как M1) и альтернативно активированные (также известные как M2). Макрофаги M1 проявляют противоонкогенные свойства, синтезируя большое количество свободных радикалов, тем самым повреждая клеточные мембраны и ДНК опухолевых клеток. В то время как макрофаги M2, напротив, проявляют проонкогенные свойства благодаря синтезу многих провоспалительных факторов, включая IL-1, IL-10, CCL12 и CCL22.
Лимфоциты, инфильтрирующие опухоль Лимфоциты, инфильтрирующие опухоль (TIL), представляют собой особую группу лимфоцитов, которые проникают в строму опухоли и непосредственно влияют на биологическое поведение опухолевых клеток. В целом, существуют две группы TIL: CD4+ (включая TIL Treg) и CD8+ (включая TIL-киллеры). Инфильтрирующие опухоль Treg являются неблагоприятными факторами в прогнозе инвазивной протоковой карциномы молочной железы, поскольку они способны подавлять другие иммунокомпетентные клетки, тем самым повышая иммунореактивность и выживаемость опухолевых клеток. Treg проявляют сильные проонкогенные свойства, экспрессируя RANKL, что положительно влияет на пролиферативную активность опухолевых клеток, экспрессирующих RANK. Более того, известно, что опухолевые клетки многих видов рака (включая IDC типа NOS) способны привлекать Treg в очаг опухоли и создавать основу для собственной иммунорезистентности. Роберт Д. Шрайбер и др. назвали это явление "иммуноредактированием рака".
Однако CD8+-клетки ингибируют онкогенез, главным образом за счет увеличения апоптогенного потенциала опухолевых клеток. NK-клетки являются основными противоонкогенными лимфоцитами, которые могут уничтожать опухолевые клетки, используя такие механизмы, как перфорин-гранзимные и рецепторные пути смерти, а также антителозависимую цитотоксичность.
Вывод Мы рассмотрели внеклеточный матрикс, сосудистый компонент и клеточное микроокружение, а также их межклеточные взаимодействия как потенциальные молекулярные и клеточные регуляторы, влияющие на опухолевый процесс при IDC NOS. Различные эффекты этих факторов подчеркивают динамичное прогрессирование протоковых карцином. Однако изменения в опухолях носят непрерывный, системный характер и зависят от состояния стромы. В конечном итоге, были рассмотрены примеры морфологических и функциональных изменений во внеклеточном матриксе, сосудистом компоненте и клеточном микроокружении как потенциальные регуляторы при раке молочной железы. Показана необходимость тщательной стратификации пациентов в соответствии с их основными клиническими ситуациями (первичные пролиферирующие опухоли или распространенные метастазы, доминирующие компоненты в микросреде и т.д.) и использования комбинированных терапевтических подходов, чтобы избежать создания одной проблемы при решении другой.
Литература
Parijatham ST. Diagnosis and management of high-risk breast lesions. J Natl Compr Canc Netw. 2018;16(11):1391–1396. doi:10.6004/JNCCN.2018.7099.
Brogi E, Krystel-Whittemore M. Papillary neoplasms of the breast including upgrade rates and management of intraductal papilloma without atypia diagnosed at core needle biopsy. Modern Pathol. 2020;34(1):1. doi:10.1038/s41379-020-00706-5.
Coutant C, Canlorbe G, Bendifallah S, Beltjens F. Prise en charge des proliférations épithéliales du sein avec et sans atypies: hyperplasie canalaire atypique, métапlasие cylindrique avec atypie, néoplasies lobulaires, proliférations épитhelialес sans atypie, mastопатие fibрокистике, аденоз, cicatrices радиаре, мукоцелес, лезионс пролиферативес апокринес: recommandations pour la pratique clinique. J Gynecol Obstet Biol Reprod (Paris). 2015;44(10):980–995. doi:10.1016/J.JGYN.2015.09.037.
Solin LJ. Management of Ductal Carcinoma in situ (DCIS) of the breast: present approaches and future directions. Curr Oncol Rep. 2019;21(4):81–88. doi:10.1007/S11912-019-0777-3.
Stachs A, Stubert J, Reimer T, Hartmann S. Benign breast disease in women. Dtsch Arztebl Int. 2019;116(33–34):565–573. doi:10.3238/ARZTEBL.2019.0565.
Thorat MA, Balasubramanian R. Breast cancer prevention in high-risk women. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol. 2020;65:18–31. doi:10.1016/J.BPOBGYN.2019.11.006.
Zhang Y, Kleer CG. Phyllodes tumor of the breast: histopathologic features, differential diagnosis, and molecular/genetic updates. Arch Pathol Lab Med. 2016;140(7):665–671. doi:10.5858/ARPA.2016-0042-RA.
Piersma B, Hayward MK, Weaver VM. Fibrosis and cancer: a strained relationship. Biochim Biophys Acta Rev Cancer. 2020;1873(2):188356. doi:10.1016/J.BBCAN.2020.188356.
Rakha EA, Miligy IM, Gorringe KL, et al. Invasion in breast lesions: the role of the epithelial–stroma barrier. Histopathology. 2018;72(7):1075–1083. doi:10.1111/HIS.13446.
Yu K, Rohr J, Liu Y, et al. Progress in triple negative breast carcinoma pathophysiology: potential therapeutic targets. Pathol Res Pract. 2020;216(4):152874. doi:10.1016/J.PRP.2020.152874.
Chen W, Wei W, Yu L, et al. Mammary development and breast cancer: a notch perspective. J Mammary Gland Biol Neoplasia. 2021;26(3):309–320. doi:10.1007/S10911-021-09496-1.
Makki J. Diversity of breast carcinoma: histological subtypes and clinical relevance. Clin Med Insights Pathol. 2015;8(1):23. doi:10.4137/CPATH.S31563.
Cserni G. Histological type and typing of breast carcinomas and the WHO classification changes over time. Pathologica. 2020;112(1):25–41. doi:10.32074/1591-951X-1-20.
Chen H, Bai F, Wang M, Zhang M, Zhang P, Wu K. The prognostic significance of co-existence ductal carcinoma in situ in invasive ductal breast cancer: a large population-based study and a matched case-control analysis. Ann Transl Med. 2019;7(18):484. doi:10.21037/ATM.2019.08.16.
Kim M, Kim M, Chung YR, Park SY. Mammary carcinoma arising in microglandular adenosis: a report of five cases. J Pathol Transl Med. 2017;51(4):422–427. doi:10.4132/JPTM.2016.11.11.
Scholl AR, Flanagan MB. Educational case: invasive ductal carcinoma of the breast. Acad Pathol. 2020;7:7. doi:10.1177/2374289519897390.
Zagelbaum NK, Ward MF, Okby N, Karpoff H. Invasive ductal carcinoma of the breast with osteoclast-like giant cells and clear cell features: a case report of a novel finding and review of the literature. World J Surg Oncol. 2016;14(1). doi:10.1186/S12957-016-0982-6.
Fu Z, Song P, Li D, et al. Cancer-associated fibroblasts from invasive breast cancer have an attenuated capacity to secrete collagens. Int J Oncol. 2014;45(4):1479–1488. doi:10.3892/IJO.2014.2562/HTML.
Oskarsson T. Extracellular matrix components in breast cancer progression and metastasis. Breast. 2013;2(S2)
–72. doi:10.1016/J.BREAST.2013.07.012.
Giussani M, Landoni E, Merlino G, et al. Extracellular matrix proteins as diagnostic markers of breast carcinoma. J Cell Physiol. 2018;233(8):6280–6290. doi:10.1002/JCP.26513.
Cox TR, Erler JT. Molecular pathways: connecting fibrosis and solid tumor metastasis. Clin Cancer Res. 2014;20(14):3637–3643. doi:10.1158/1078-0432.CCR-13-1059.
Wyckoff JB, Wang Y, Lin EY, et al. Direct visualization of macrophage-assisted tumor cell intravasation in mammary tumors. Cancer Res. 2007;67(6):2649–2656. doi:10.1158/0008-5472.CAN-06-1823.
Egeblad M, Rasch MG, Weaver VM. Dynamic interplay between the collagen scaffold and tumor evolution. Curr Opin Cell Biol. 2010;22(5):697–706. doi:10.1016/J.CEB.2010.08.015.
Lindgren M, Jansson M, Tavelin B, Dirix L, Vermeulen P, Nyström H. Type IV collagen as a potential biomarker of metastatic breast cancer. Clin Exp Metastasis. 2021;38(2):175–185. doi:10.1007/S10585-021-10082-2.
Chang J, Chaudhuri O. Beyond proteases: basement membrane mechanics and cancer invasion. J Cell Biol. 2019;218(8):2456–2469. doi:10.1083/JCB.201903066.
Nyström H, Naredi P, Hafström L, Sund M. Type IV collagen as a tumour marker for colorectal liver metastases. Eur J Surg Oncol. 2011;37(7):611–617. doi:10.1016/J.EJSO.2011.04.010.
Dhakal HP, Bassarova A, Naume B, et al. Breast carcinoma vascularity: a comparison of manual microvessel count and Chalkley count. Histol Histopathol. 2009;24(8):1049–1059. doi:10.14670/HH-24.1049.
Senchukova MA, Nikitenko NV, Tomchuk ON, Zaitsev NV, Stadnikov AA. Different types of tumor vessels in breast cancer: morphology and clinical value. Springerplus. 2015;4(1). doi:10.1186/S40064-015-1293-Z.
Kim J. Pericytes in breast cancer. Adv Exp Med Biol. 2019;1147:93–107. doi:10.1007/978-3-030-16908-4_3.
Coleman RE, Gregory W, Marshall H, Wilson C, Holen I. The metastatic microenvironment of breast cancer: clinical implications. Breast. 2013;2(S2)
–56. doi:10.1016/J.BREAST.2013.07.010.
Soysal SD, Tzankov A, Muenst SE. Role of the tumor microenvironment in breast cancer. Pathobiology. 2015;82(3–4):142–152. doi:10.1159/000430499.
Cowell CF, Weigelt B, Sakr RA, et al. Progression from ductal carcinoma in situ to invasive breast cancer: revisited. Mol Oncol. 2013;7(5):859–869. doi:10.1016/J.MOLONC.2013.07.005.
Folgueira MAAK, Maistro S, Katayama MLH, et al. Markers of breast cancer stromal fibroblasts in the primary tumour site associated with lymph node metastasis: a systematic review including our case series. Biosci Rep. 2013;33(6). doi:10.1042/BSR20130060.
Nguyen M, Lee MC, Wang JL, et al. The human myoepithelial cell displays a multifaceted anti-angiogenic phenotype. Oncogene. 2000;19(31):3449–3459. doi:10.1038/SJ.ONC.1203677.
Del Valle PR, Milani C, Brentani MM, et al. Transcriptional profile of fibroblasts obtained from the primary site, lymph node and bone marrow of breast cancer patients. Genet Mol Biol. 2014;37(3):480. doi:10.1590/S1415-47572014000400002.
Orimo A, Gupta PB, Sgroi DC, et al. Stromal fibroblasts present in invasive human breast carcinomas promote tumor growth and angiogenesis through elevated SDF-1/CXCL12 secretion. Cell. 2005;121(3):335–348. doi:10.1016/J.CELL.2005.02.034.
Martinez-Outschoorn UE, Lisanti MP, Sotgia F. Catabolic cancer-associated fibroblasts transfer energy and biomass to anabolic cancer cells, fueling tumor growth. Semin Cancer Biol. 2014;25:47–60. doi:10.1016/J.SEMCANCER.2014.01.005.
Pelon F, Bourachot B, Kieffer Y, et al. Cancer-associated fibroblast heterogeneity in axillary lymph nodes drives metastases in breast cancer through complementary mechanisms. Nat Commun. 2020;11(1). doi:10.1038/S41467-019-14134-W.
Choi YP, Lee JH, Gao MQ, et al. Cancer-associated fibroblast promote transmigration through endothelial brain cells in three-dimensional in vitro models. Int J Cancer. 2014;135(9):2024–2033. doi:10.1002/IJC.28848.
Wen S, Hou Y, Fu L, et al. Cancer-associated fibroblast (CAF)-derived IL32 promotes breast cancer cell invasion and metastasis via integrin β3–p38 MAPK signalling. Cancer Lett. 2019;442:320–332. doi:10.1016/J.CANLET.2018.10.015.
da Cunha A, Michelin MA, Murta EFC. Pattern response of dendritic cells in the tumor microenvironment and breast cancer. World J Clin Oncol. 2014;5(3):495. doi:10.5306/WJCO.V5.I3.495.
Varikuti S, Singh B, Volpedo G, et al. Ibrutinib treatment inhibits breast cancer progression and metastasis by inducing conversion of myeloid-derived suppressor cells to dendritic cells. Br J Cancer. 2020;122(7):1013–1023. doi:10.1038/s41416-020-0743-8.
Fainaru O, Almog N, Yung CW, et al. Tumor growth and angiogenesis are dependent on the presence of immature dendritic cells. FASEB J. 2010;24(5):1411. doi:10.1096/FJ.09-147025.
Gardner A, Ruffell B. Dendritic cells and cancer immunity. Trends Immunol. 2016;37(12):855–865. doi:10.1016/J.IT.2016.09.006.
Michielsen AJ, Hogan AE, Marry J, et al. Tumour tissue microenvironment can inhibit dendritic cell maturation in colorectal cancer. PLoS One. 2011;6(11)
. doi:10.1371/JOURNAL.PONE.0027944.
Ning Y, Shen K, Wu Q, et al. Tumor exosomes block dendritic cells maturation to decrease the T cell immune response. Immunol Lett. 2018;199:36–43. doi:10.1016/J.IMLET.2018.05.002.
Chen X, Shao Q, Hao S, et al. CTLA-4 positive breast cancer cells suppress dendritic cells maturation and function. Oncotarget. 2017;8(8):13703–13715. doi:10.18632/ONCOTARGET.14626.
Obeid E, Nanda R, Fu YX, Olopade OI. The role of tumor-associated macrophages in breast cancer progression (review). Int J Oncol. 2013;43(1):5–12. doi:10.3892/ijo.2013.1938.
Qiu SQ, Waaijer SJH, Zwager MC, de Vries EGE, van der Vegt B, Schröder CP. Tumor-associated macrophages in breast cancer: innocent bystander or important player? Cancer Treat Rev. 2018;70:178–189. doi:10.1016/J.CTRV.2018.08.010.
Gordon S. Alternative activation of macrophages. Nat Rev Immunol. 2003;3(1):23–35. doi:10.1038/nri978.
Jamiyan T, Kuroda H, Yamaguchi R, Abe A, Hayashi M. CD68- and CD163-positive tumor-associated macrophages in triple negative cancer of the breast. Virchows Arch. 2020;477(6):767–775. doi:10.1007/s00428-020-02855-z.
Solinas G, Germano G, Mantovani A, Allavena P. Tumor-associated macrophages (TAM) as major players of the cancer-related inflammation. J Leukoc Biol. 2009;86(5):1065–1073. doi:10.1189/JLB.0609385.
Paijens ST, Vledder A, de Bruyn M, Nijman HW. Tumor-infiltrating lymphocytes in the immunotherapy era. Cell Mol Immunol. 2021;18(4):842–859. doi:10.1038/S41423-020-00565-9.
Stanton SE, Disis ML. Clinical significance of tumor-infiltrating lymphocytes in breast cancer. J Immunother Cancer. 2016;4(1). doi:10.1186/S40425-016-0165-6.
Allen M, Jones JL. Jekyll and Hyde: the role of the microenvironment on the progression of cancer. J Pathol. 2011;223(2):163–177. doi:10.1002/PATH.2803.
Tanaka A, Sakaguchi S. Targeting Treg cells in cancer immunotherapy. Eur J Immunol. 2019;49(8):1140–1146. doi:10.1002/EJI.201847659.
Núñez NG, Tosello Boari J, Ramos RN, et al. Tumor invasion in draining lymph nodes is associated with Treg accumulation in breast cancer patients. Nat Commun. 2020;11(1). doi:10.1038/S41467-020-17046-2.
Infante M, Fabi A, Cognetti F, Gorini S, Caprio M, Fabbri A. RANKL/RANK/OPG system beyond bone remodeling: involvement in breast cancer and clinical perspectives. J Exp Clin Cancer Res. 2019;38(1). doi:10.1186/S13046-018-1001-2.
van Dam PA, Verhoeven Y, Trinh XB, et al. RANK/RANKL signaling inhibition may improve the effectiveness of checkpoint blockade in cancer treatment. Crit Rev Oncol Hematol. 2019;133:85–91. doi:10.1016/J.CRITREVONC.2018.10.011.
Del Alcazar CRG, Alečkovic M, Polyak K. Immune escape during breast tumor progression. Cancer Immunol Res. 2020;8(4):422–427. doi:10.1158/2326-6066.CIR-19-0786.
Schreiber RD, Old LJ, Smyth MJ. Cancer immunoediting: integrating immunity’s roles in cancer suppression and promotion. Science. 2011;331(6024):1565–1570. doi:10.1126/SCIENCE.1203486.
Wu SY, Fu T, Jiang YZ, Shao ZM. Natural killer cells in cancer biology and therapy. Mol Cancer.